Para começar, coloque o coração e os pulmões desidratados isolados de um camundongo em uma placa de dissecção contendo 40 a 50 mililitros de PBS. Posicione-o sob um microscópio de campo claro com aumento de 10x e configure a iluminação. Em seguida, coloque a superfície dorsal do coração na placa de dissecção.
Com tesoura cirúrgica, separar cuidadosamente os ventrículos dos átrios após identificar a transição entre a parede ventricular e a parede atrial. Coloque os átrios separados na placa de dissecção com a base do coração virada para cima. Orientar os átrios com os lobos pulmonares posicionados posteriormente, o átrio esquerdo e seu apêndice situados à direita e o átrio direito e seu apêndice situado à esquerda.
Fixe o tecido ventricular esquerdo restante na placa de dissecção para garantir a preparação. Espalhe os lóbulos pulmonares suavemente sem exercer força excessiva e fixe-os na placa de dissecção. Em seguida, encontre a aorta com o arco aórtico no centro da base do coração.
Remova o tecido conjuntivo e adiposo ao redor da base do coração, preservando todos os pontos de referência identificados. Além disso, remova o arco aórtico para limpar a visão da base do coração. Detectar o tronco pulmonar diretamente à direita da aorta e traçar seu caminho em direção ao dorso para identificar as artérias pulmonares.
Para confirmar sua posição, siga seu trajeto até o lobo esquerdo e lobos superior ou médio direito para identificar o hilo pulmonar. Determine a localização dos brônquios principais esquerdo e direito atrás da aorta. Confirme sua posição traçando seu caminho em direção ao hilo pulmonar.
Em seguida, identifique a veia cava superior à esquerda da aorta e trace seu trajeto até o átrio direito, próximo ao apêndice atrial direito. Usando dissecção romba com pinça fina, desprenda cuidadosamente as artérias pulmonares da superfície superior do átrio, em seguida, corte-as no hilo pulmonar e mova-as para o lado para desvendar a parede livre do átrio esquerdo e as veias pulmonares em visão total. Remova os brônquios principais do hilo pulmonar e descarte o tecido brônquico.
Examinar o hilo pulmonar para identificar o óstio da artéria pulmonar e o brônquio principal. Para separar os átrios e ventrículos, faça um corte da parte anterior do ventrículo direito remanescente e mova-se para cima através da valva tricúspide até a face anterior da veia cava superior, abrindo o átrio direito a partir do lado frontal. Em seguida, cortar a parede livre posterior do átrio direito adjacente ao septo interatrial para criar uma divisão entre o átrio direito e esquerdo.
Cortar a parede posterior do ventrículo direito junto ao septo interventricular para desconectar completamente os ventrículos esquerdo e direito. Remova parte do tecido pulmonar basal para aparar o tamanho dos lobos pulmonares, deixando de três a quatro milímetros do tecido pulmonar.
