Para começar a desparafinar seções de parafina previamente preparadas do adesivo de Peyer isolado de camundongo modelo de neuropatia imunoglobulina A ou IgA, mergulhe cada seção sequencialmente em gradientes de xileno e etanol por cinco minutos. Em seguida, enxágue a seção em água destilada. Para a recuperação do antigénio, aquecer a solução de citrato de sódio durante dois minutos num autoclave.
Em seguida, coloque a fatia de tecido na solução e aqueça-a em alta temperatura por cinco minutos. Depois de esfriar, incube a seção em uma solução de peróxido de hidrogênio a 3% por 15 minutos em temperatura ambiente, longe da luz. Em seguida, aplique soro de cabra a 10% uniformemente na seção de tecido e incube por 30 minutos em temperatura ambiente para bloquear a seção.
Depois de sacudir a solução de bloqueio, aplique uma quantidade apropriada do anticorpo primário preparado em cada seção. Incube as seções deitadas em uma caixa úmida durante a noite a quatro graus Celsius. No dia seguinte, cubra o tecido com uma gota do anticorpo secundário marcado com HRP e incube-o em temperatura ambiente por 50 minutos.
Em seguida, aplique a solução cromogênica DAB recém-preparada em cada seção e aguarde o desenvolvimento da cor. Repita a seção com hematoxilina por aproximadamente um minuto. Em seguida, enxágue as seções por 10 minutos com água da torneira até que voltem à cor azul.
Para a desidratação, colocar cada secção sequencialmente em gradientes de etanol e xileno durante cinco minutos cada. Depois que todas as seções estiverem ligeiramente secas, sele cada seção com goma neutra. Os resultados imuno-histoquímicos mostraram que a expressão dos marcadores de células B CD20 e CXCR5 foi significativamente maior no grupo modelo de neuropatia por IgA, em comparação com o grupo controle.
No entanto, a dioscina pode inibir a expressão dos marcadores moleculares.
