Para começar, prepare o mouse para a cirurgia e posicione-o sobre o quadro estereotáxico. Em seguida, levante a pele do crânio e segure a tesoura entre o olho direito e a orelha para criar uma incisão. Corte para o lado esquerdo do crânio, seguindo as marcas da incisão e remova o retalho redondo de pele resultante.
Com uma lâmina de bisturi ou uma micro cureta, coce suavemente a superfície do crânio para remover o periósteo. Use soro fisiológico e vácuo para manter a área cirúrgica limpa de detritos. Risque o periósteo para garantir melhor aderência à cola de cianoacrilato e a um cimento dental.
Em seguida, com um lápis autoclavado, marque a posição da janela craniana. Segure a broca na mão dominante e uma seringa ou pinça na mão não dominante. Aplicar soro fisiológico gelado no calvário para evitar o superaquecimento e manter a visão cirúrgica limpa.
Durante a perfuração, posicione a tampa de vidro deslizante no topo do crânio para confirmar se ela se encaixa exatamente dentro da janela craniana. Uma vez possível deprimir o retalho craniano, utilizar pinça para retirar cuidadosamente o fragmento do campo cirúrgico. Se ocorrer um pequeno sangramento, use uma esponja hemostática para a aplicação tópica de soro fisiológico gelado com leve pressão para ajudar a reduzir a perda de sangue.
Tome as células de glioma C6 cultivadas para implantação. Aspirar um microlitro de suspensão celular em uma seringa de microlitro estanque ao gás. Em seguida, posicione a seringa dentro da estrutura estereotáxica.
Para implantar células para imagens de dois fótons, injete 0,5 microlitros da suspensão celular, a 0,8 milímetro de profundidade na área superficial do cérebro. Após a injeção, retraia a agulha e saia do tecido cerebral. Agora, mova a barra da cabeça e a tampa de vidro do álcool para uma solução salina e use uma ponta de vácuo ou pinça para navegar esses componentes até o local cirúrgico.
Posicione a tampa de vidro dentro da janela craniana e aplique uma pequena quantidade de cola de cianoacrilato. Remova qualquer derramamento de cola na tampa de vidro deslizando com um aplicador de ponta de algodão ou riscando-o suavemente com um bisturi. Fixe a tampa de vidro deslizante na janela craniana e aplique a barra de cabeça.
Misture o cimento dental, posicione a barra da cabeça e aplique cimento na área circundante. Limpe qualquer cimento supérfluo com uma ponta de seringa, bisturi ou ponta de broca. Depois de selar a janela craniana, verifique se há áreas expostas do crânio.
