Comece preparando o inóculo do vírus. Ative o estoque de rotavírus adicionando 10 microgramas por microlitro de tripsina de Worthington e incubando a 37 graus Celsius por uma hora. Em seguida, diluir 50 microlitros do estoque viral ativado com 50 microlitros de CMGF-Next, substituir o meio das monocamadas HIO por 100 microlitros de inóculo viral para infectar as monocamadas.
Para infecção por rotavírus, faça uma pontuação única em todo o comprimento da monocamada usando uma agulha de calibre 25. Incubar as placas a 37 graus Celsius por duas horas. Após a incubação, retirar o inóculo e lavar as monocamadas uma vez com 1 X PBS.
Em seguida, adicione 100 microlitros de meio de diferenciação sem vermelho fenol. Coloque a lâmina em uma incubadora de 37 graus Celsius até ficar pronta para a imagem.
