Preparo de lâminas para imunohistoquímica cíclica multiplex de cortes de tecido canceroso

Para começar, obtenha tumor primário de pulmão ou tecido de metástase cerebral de câncer de pulmão, incorpore o tecido tumoral em blocos de parafina emparelhados e, usando um microtom, corte-o em cortes de quatro micrômetros de espessura. Coloque as seções na água. Escolha o melhor usando uma pinça e cole-o na lâmina revestida de polilisina.

Para aumentar a adesão do tecido, incube a lâmina em um forno a 65 graus Celsius por 30 minutos. Para desidratação, imergir a lâmina em xileno, seguida de soluções de etanol de concentrações decrescentes, em seguida, lavá-la com a água ionizada por três minutos. Em seguida, submerja a lâmina em solução tampão citrato de sódio.

Sujeite a lâmina a fogo alto e pressão em uma panela de pressão e deixe esfriar até a temperatura ambiente em água destilada por três minutos. Por fim, lave a lâmina três vezes com PBS por cinco minutos cada.