Comece a preparação da aquifase dissolvendo 0,15 gramas de polissorbato 80 em 28,2 mililitros de PBS, mexendo a 40 graus Celsius. Para preparar a formulação da fase oleosa, dissolva o trioleato de sorbitano 85 DOTAP e o ácido retinóico em esqualeno enquanto agita a 40 graus Celsius. Em seguida, adicione a fase de aquiescência a um mililitro por minuto à fase oleosa, mexendo a 1400 RPM para a preparação primária da emulsão de óleo e água.
Pré-emulsione a mistura usando um emulsificante de alto cisalhamento a 30.000 RPM por seis minutos. Trate a emulsão primária de óleo e água com um homogeneizador de alta pressão por 12 ciclos a 900 bar para obter uma nanoemulsão homogênea. Recolher a emulsão num balão de 50 mililitros e esterilizar por filtro através de uma seringa com um filtro PES de 0,2 mícron.
Conecte o frasco à linha schlink através do cateter, girando a torneira de três vias para conectar o sistema ao tubo de vácuo. Ligue a bomba de vácuo para criar um vácuo no frasco. Em seguida, gire a torneira de três vias para conectar o sistema ao tubo de argônio e encha-o com argônio.
Substitua a rolha dos frascos e sele-a com uma película de parafina. Embrulhe o frasco em papel alumínio e guarde-o a 40 graus Celsius. Ligue o instrumento de dispersão dinâmica de luz e aguarde 30 minutos para que a fonte de luz laser se estabilize.
Dilua a nanoemulsão 50 vezes com água ultrapura e adicione um mililitro de amostra à célula de amostra correspondente. No instrumento, ajuste a temperatura para 25 graus Celsius. Escolha a água como meio dispersante e os pratos de plástico descartáveis como célula de medição.
Carregue as amostras e meça o tamanho das partículas. Relate o valor médio de três medições repetidas para cada amostra como resultado.
