Para começar, carregue um único mouse da caixa para a sala de teste em uma gaiola de plástico coberta sem material de cama. Coloque a gaiola na frente de uma câmera de vídeo. Em seguida, coloque um espelho para ver o rosto do mouse quando ele estiver de costas para a câmera.
Registre o comportamento do mouse por 10 minutos. Após a gravação, limpe a gaiola de observação antes de registrar o próximo animal. Tenha um observador cego para as condições experimentais para analisar o comportamento registrado do rato.
Observe cada episódio de cuidados faciais durante a gravação de 10 minutos. Faça uma distinção entre cuidados faciais isolados e comportamentos de cuidados faciais durante a limpeza corporal. Determine o número de episódios de cuidados faciais com um critério de corte de quatro segundos.
O tempo entre as ações de limpeza de menos de quatro segundos é definido como uma pausa dentro de um único episódio. Um tempo superior a quatro segundos é definido como uma interrupção total das ações de limpeza entre dois episódios. Coloque a cauda do mouse em um grampo de silicone macio e prenda o grampo magneticamente a uma placa de metal sobre a mesa.
Coloque um suporte de plástico de três paredes sobre o mouse de forma que apenas a cabeça se projete do recipiente. Coloque um peso em cima do suporte para mantê-lo no lugar. Use uma série graduada de quatro cabelos de von Frey para aplicar força ao mouse.
Habituar o mouse ao limitador e alcançar movimentos por 10 minutos. Quando o mouse estiver relaxado, aplique lentamente o cabelo de von Frey mais claro dentro do território do nervo infraorbital perto do centro das vibrissas até que ele se dobre. Classifique a resposta do mouse à estimulação em uma das seguintes categorias.
Calcule a pontuação média para as respostas ipsilaterais aos quatro cabelos de von Frey e, em seguida, calcule as pontuações médias para os lados contralaterais. Os camundongos com lesão por constrição crônica do nervo infraorbital distal exibiram um aumento pós-operatório significativo no tempo e episódios isolados de preparação facial, atingindo o pico na primeira semana e depois diminuindo gradualmente, permanecendo elevados por seis semanas. Inicialmente, os camundongos com lesão por constrição crônica do nervo infraorbital distal mostraram quase completa falta de resposta à estimulação mecânica, que, durante as semanas subsequentes, se transformou em hiper-responsividade com duração de seis semanas.
Um ligeiro aumento na responsividade à estimulação mecânica contralateral também foi observado.
