Formação de cristas neurais a partir de células-tronco pluripotentes humanas para pesquisa do sistema nervoso entérico

Para induzir a formação da crista neural, substitua o meio de manutenção da cultura de células-tronco pluripotentes humanas por 200 microlitros de meio A por centímetro quadrado da superfície do poço. Incube a cultura sob suplementação de 5% de dióxido de carbono a 37 graus Celsius por dois dias. Aspire suavemente o meio das células de confluência 100% contendo o poço e, em seguida, pipete cerca de 200 microlitros de meio B por centímetro quadrado da área da superfície do poço.

No quarto dia, alimente as células com 200 microlitros de meio B por centímetro quadrado da superfície do poço. Incube as células por mais dois dias e, em seguida, substitua o meio B por 400 microlitros por centímetro quadrado do meio C.