Preparação de amostras para 2D-HPLC-MS de Aconitum pendulum

Comece a preparação da amostra pesando o arbusto de pêndulo acônito, ou APB. Usando uma balança de sensibilidade de um por 10.000, pesar 0,25 gramas de APB seco em um tubo de microcentrífuga de três mililitros. Adicione 2,5 mililitros de metanol e depois sonice por 30 minutos a uma potência de 240 watts e uma frequência de 40 kilohertz.

Centrifugue a amostra sonicada a 1,2 G por cinco minutos e colete o sobrenadante. Filtre-o através de um filtro de membrana de 0,22 mícron. Em seguida, prepare a fase móvel bidimensional usando acetil nitrilo como fase orgânica ou fase B e água ultrapura contendo 0,1% de ácido fórmico como fase aquosa ou fase A. Depois de realizar a filtração bifásica através do filtro de 0,22 mícron, submeta as fases móveis à sonicação ultrassônica a 40 kilohertz por 15 minutos.

Purgue a fase móvel substituída para remover as bolhas. Selecione uma coluna C18 como a coluna 1D e uma coluna hidrofílica como a coluna 2D e monte-as no instrumento. Para ajustar a taxa de derivação apropriada, conecte o contorno do instrumento 2D-LC através de um T à entrada de massa e a outra extremidade do T a uma linha de derivação.

Ajustar o caudal para um valor adequado para garantir o caudal adequado ao espetro de massas.