Após pelo menos três a quatro dias da cirurgia da câmara da janela, prenda o camundongo anestesiado em um estágio de imagem com um acessório de anestesia gasosa. Usando microscopia de campo claro, obtenha uma imagem de amplo campo de visão, garantindo a visibilidade dos divots do marcador fiducial na estrutura frontal do DSFC. No mesmo dia, use a modalidade de microscopia intravital para capturar uma imagem microvascular.
Depois de colocar o mouse no leito de ressonância magnética, insira uma agulha borboleta calibre 27 com microtubos presos na veia da cauda. Prenda a câmara da janela em um dispositivo de imobilização impresso em 3D Usando uma agulha de calibre 18, injete lubrificante ocular veterinário nos sete tubos do marcador fiducial de ressonância magnética. Afixe o marcador fiducial no DSFC.
Insira a cama em um scanner de ressonância magnética pré-clínica de sete Tesla. Para aquisição, defina um campo de visão de 32 por 32 milímetros com uma matriz de 64 por 64 para 0,5 por 0,5 milímetro em resolução simples com pulsos de RF consistentes. Adquira conjuntos de imagens ponderadas T2 coronais e axiais para visualizar o plano da câmara da janela.
Prescreva e reoriente iterativamente um conjunto ponderado em T2 sagital para alinhar os cortes de imagem com o DSFC e os marcadores fiduciais, garantindo que o corte cinco contenha sinal de tecido no DSFC e o corte quatro não. Realize imagens microvasculares usando o método de ressonância magnética com contraste dinâmico selecionado. No espaço de trabalho do MATLAB, carregue os dados microvasculares, de microscopia de campo claro e de ressonância magnética microvascular e clique no botão Executar.
Navegue até o arquivo que contém os cortes de ressonância magnética ponderados em T2 e selecione até quatro cortes que exibem os marcadores fiduciais. Coloque um ponto em cada um dos sete marcadores fiduciais na imagem de ressonância magnética e combine-os com o ponto correspondente na imagem de microscopia. Selecione pelo menos três pontos de referência microvasculares na imagem microvascular svOCT e os pontos correspondentes na imagem microscópica.
Contorne o tumor na imagem de microscopia co-registrada e, em seguida, o conjunto de dados microvascular svOCT, a imagem de microscopia co-registrada e os mapas de parâmetros de ressonância magnética co-registrados aparecem. Salve o mapa para análise posterior. O corregistro de imagens microvasculares, microscopia de campo amplo e ressonância magnética em camundongos saudáveis e portadores de tumor permite a análise de correlação de métricas microvasculares e macrovasculares.
As métricas macrovasculares de ressonância magnética com contraste dinâmico mostraram fortes correlações entre as métricas microvasculares derivadas do svOCT, conforme indicado pelos valores de R ao quadrado em ambos os gráficos. As correlações foram medidas em camundongos saudáveis e portadores de tumor para avaliar a capacidade da ressonância magnética com contraste dinâmico de medir características vasculares em arquiteturas microvasculares amplamente diferentes.
