Preparação e transfecção de células HEK-293T para análise de classificação FACS

Comece cultivando células T HEK 293 em meio DMEM, suplementado com soro bovino fetal a 10%. No dia anterior à transfecção, semeie células T HEK 293 em uma placa de seis poços para atingir aproximadamente 60% de confluência no dia seguinte. Em seguida, transfecte as células da amostra experimental em uma placa de seis poços com plasmídeos para ensaio NHEJ ou HR usando um kit de transfecção comercial.

Para controles de calibração de facs, deixe um poço de células não transfectadas como controle negativo. Transfectar as células em uma placa de seis poços com plasmídeos para GFP, controle de cor única, ou mCherry, controle de cor única.