Para começar, insira uma sonda retal lubrificada para controlar a temperatura do rato anestesiado durante a cirurgia. Depois de localizar a região jugular na região inferior direita do pescoço do rato anestesiado acima da clavícula, use a pinça atraumática DeBakey para agarrar suavemente a pele e fazer uma incisão precisa com uma tesoura fina e afiada ou um bisturi. Corte suavemente o tecido com uma pinça de padrão padrão.
Localize e libere suavemente a veia jugular de seu compartimento muscular. Coloque um fio de sutura de seda 4-0 para ligar com segurança o lado distal da veia jugular. Use a sutura com os porta-agulhas para tensionar a veia jugular.
Coloque uma sutura 4-0 no lado proximal da veia jugular e prepare um nó de cirurgião sem apertá-lo. Usando uma tesoura de microdissecação Vannas, faça uma pequena incisão na veia jugular. Depois de segurar cuidadosamente a parede da veia com uma pequena pinça, insira o cateter PE50 na veia jugular.
Avance ligeiramente o cateter e, para confirmar sua colocação correta na veia, retire uma pequena quantidade de sangue e injete-o novamente. Aperte o nó previamente preparado para prender o cateter. Aplique uma gota de lidocaína na área incisada.
Cubra a incisão com uma gaze estéril úmida. Use a pinça atraumática DeBakey para agarrar a pele do triângulo de Scarpa na perna esquerda e faça uma incisão com uma tesoura fina e afiada ou um bisturi. Dilacerate suavemente o tecido com uma pinça de padrão padrão.
Localize a tríade femoral e coloque uma pinça sob a tríade. Em seguida, com uma segunda pinça de padrão padrão, separe cuidadosamente a artéria do nervo e da veia femoral. Coloque uma sutura 4-0 para ligar a artéria femoral distalmente e faça a sutura com os porta-agulhas para colocar a artéria femoral em tensão.
Agora coloque uma sutura 4-0 no lado proximal da artéria femoral e prepare um nó cirurgião sem fechá-lo. Após o clampeamento da artéria, use uma tesoura de microdissecação Vannas para fazer uma incisão transversal na artéria femoral. Segure a parede da artéria com uma pinça de padrão padrão e canule a artéria femoral com o cateter segurando-a com uma pinça.
Solte suavemente a artéria e certifique-se de que o sangue não esteja fluindo de volta para o cateter. Se o sinal for bom, avance o cateter ligeiramente para dentro da artéria e aperte o nó do cirurgião previamente preparado. Administre heparina no rato e coloque uma gaze estéril umedecida sobre a área incisada.
Após 10 minutos de estabilização, registre-se os valores hemodinâmicos basais por cinco minutos. Para induzir o choque hemorrágico, use uma seringa de um mililitro para extrair cinco mililitros de sangue da artéria femoral em cinco minutos. Prepare uma mistura de solução de Ringer com 50% de lactato e 50% de sangue coletado em temperatura ambiente.
Coloque uma seringa de dois mililitros cheia com a mistura na extremidade da cânula da veia jugular. Para manutenção do choque hemorrágico, quando a pressão arterial média exceder 38 milímetros de mercúrio, retire 200 microlitros de sangue da artéria femoral. Se a pressão cair abaixo de 32 milímetros de mercúrio, injete 200 microlitros da mistura de Ringer com 50% de sangue e 50% de lactato através da veia jugular.
Após a preparação estéril da cauda com uma gaze, use a ponta da agulha para tirar uma gota de sangue da extremidade da cauda para medir o lactato no sangue periférico. Finalmente, ressuscite o rato com uma solução de Ringer com lactato usando uma seringa de 20 mililitros através do cateter jugular com uma bomba de seringa.