Ensaio de Espaço Social para Explorar Defeitos de Comportamento Social no Modelo Drosophila de Transtorno do Espectro do Autismo

Para começar, separe as moscas machos de uma população mista de moscas no gelo e coloque-as em um frasco de coleta. Para preparar a arena, coloque dois espaçadores triangulares de acrílico planos em cima de um painel de vidro retangular, de modo que os ângulos retos dos espaçadores de acrílico fiquem alinhados com os cantos do painel de vidro. Em seguida, coloque dois espaçadores retangulares de acrílico planos no painel de vidro alinhados com as bases dos dois espaçadores triangulares.

Confirme se os quatro espaçadores de acrílico circundam uma arena triangular no painel de vidro retangular que não é coberto por espaçadores. Posicione um adesivo de uma régua em um dos espaçadores triangulares, garantindo que fique visível de cima. Agora coloque um segundo painel de vidro retangular em cima dos espaçadores de acrílico para alinhá-lo com o painel de vidro na parte inferior.

Usando quatro pequenos clipes de fichário, prenda os painéis e espaçadores. Para o ensaio, remova o clipe de fichário inferior direito e desloque levemente o espaçador retangular para fora para criar uma lacuna. Para transferir moscas do frasco de coleta para a arena do espaço social, aspire-as suavemente através do espaço criado.

Deslize imediatamente o espaçador retangular e prenda o clipe de fichário de volta em sua posição. Segurando a câmara na vertical, bata suavemente três vezes em uma almofada macia para permitir que todas as moscas se acomodem na base. Prenda a câmara na posição vertical e inicie o temporizador.

Tire uma foto nítida da arena após 20 minutos. Analise com ImageJ para listar as distâncias entre moscas do vizinho mais próximo. As moscas mutantes mostram distâncias de vizinhança mais próximas significativamente maiores do que as contrapartes de controle, indicando uma preferência por maior distanciamento de outras moscas.