Para começar, prepare a linha de teste e a solução de revestimento da linha de controle. Dilua o anticorpo de captura de proteína C reativa e a imunoglobulina G anti-coelho de cabra com tampão fosfato. Em seguida, coloque a placa de cloreto de polivinila corretamente e remova o papel protetor localizado a 25 milímetros da borda da placa.
Alinhe e cole a membrana de nitrocelulose ao longo da borda inferior do papel protetor restante à placa de cloreto de polivinila. Dispense a linha de teste e as soluções de revestimento da linha de controle na membrana de nitrocelulose, garantindo que ela seja colocada a 20 milímetros de distância da borda superior, formando uma linha de teste. Para a secagem, coloque a membrana de nitrocelulose em condições com umidade inferior a 30% e faixa de temperatura de 18 a 26 graus Celsius.
Para preparar a almofada conjugada, mergulhe a almofada conjugada na solução de tratamento da almofada conjugada e, em seguida, coloque a almofada conjugada embebida em um forno de secagem para tratamento de secagem durante a noite. Dilua a solução conjugada de anticorpo QD nano bead preparada com a solução conservante e dispense-a na almofada conjugada. Para preparação de almofadas de amostra.
Mergulhe a almofada de amostra na solução de tratamento da almofada de amostra. Em seguida, coloque a almofada de amostra embebida em um forno de secagem regulado a 45 graus Celsius e seque por 24 horas. Em seguida, colocar o papel absorvente, a almofada de conjugação e a almofada de amostra na placa de policloreto de vinilo com a membrana de nitrocelulose.
Pipete 10 microlitros de amostra de plasma ou solução calibradora em um mililitro de tampão PBS contendo 0,1% entre 20. Em seguida, transfira 100 microlitros da amostra diluída preparada para a almofada de amostra da tira de teste. Após uma corrida de 15 minutos, observe os sinais fluorescentes da linha de teste e da linha de controle sob exposição à luz ultravioleta para obter resultados qualitativos.
Insira o cartão de tira em um leitor de ensaio de fluxo lateral fluorescente para obter as intensidades de fluorescência para análise quantitativa.
