Para começar, coloque o eletroencefalograma ou eletrodo de EEG implantado em rato anestesiado em decúbito dorsal. Usando um bisturi, faça uma incisão de dois a três centímetros de comprimento da margem superior do esterno longitudinalmente ao longo do meio do pescoço. Em seguida, separe sem rodeios o tecido subcutâneo e o músculo esterno-hióideo, expondo totalmente a traqueia e os músculos longo do pescoço em ambos os lados da traqueia.
Separe sem rodeios os músculos longos do pescoço do nível da glândula tireoide para baixo, expondo a primeira e a segunda vértebras cervicais. Expanda a área do pescoço com um dilatador de tecido de rato para acessar totalmente o local da cirurgia. Use uma pinça fina para separar cuidadosamente os músculos e tecidos visíveis no espaço intervertebral cervical, expondo o local onde a artéria vértebra entra na primeira vértebra cervical.
Em seguida, insira a caneta de eletrocoagulação pré-aquecida na área por três a cinco segundos para eletrocoagular e cortar a artéria vertebral. Separe os músculos e a fáscia ao longo da borda interna do músculo esternocleidomastóideo. Exponha e libere a artéria carótida comum bilateral ou ACC e dê um nó solto.
Aperte rapidamente o primeiro nó solto para bloquear o fluxo sanguíneo no CCA quando o rato recuperar a consciência e exibir uma resposta de endireitamento. De acordo com o método de amarração de controle da agulha, amarre o CCA com uma agulha de seringa de 0,5 milímetro de diâmetro, usando fio de náilon de seis o e puxe cuidadosamente a agulha para estreitar a artéria carótida. Após 30 minutos de isquemia, desatar o primeiro nó para permitir que a ACC seja reperfusiva.
Desatar o segundo nó para induzir estenose CCA e, assim, um coma sustentado. Por fim, costure a incisão usando uma sutura de quatro o o. O bloqueio abrupto da ACC leva a uma supressão significativa das atividades do EEG e do eletromiograma, essencialmente plana, indicando comprometimento grave.
À medida que a compensação corporal melhora a profusão de sangue, os ratos recuperam gradualmente a consciência. Após o despertar, suas leituras de EEG e eletromiograma se recuperam quase completamente, indicando a reversão dos efeitos isquêmicos.
