Para começar, prenda a tubulação de 3 por 8 polegadas logo antes da porta aórtica para interromper o fluxo de perfusato. Posicione o coração do porco preparado com a parede posterior voltada para o operador e incline a câmara do órgão em cerca de 20 graus. Em seguida, coloque a cânula aórtica em um ângulo de 90 graus da porta aórtica e solte a linha aórtica lentamente.
Desar a cânula aórtica, permitindo que o perfusato flua para ela gradualmente. Agora, diminua lentamente o ângulo da cânula aórtica até que ela se alinhe com a porta aórtica e, em seguida, conecte-a totalmente à linha aórtica. Uma vez totalmente conectado, massageie suavemente o coração intermitentemente para evitar distensão devido ao enchimento do ventrículo esquerdo.
Ventile o ventrículo esquerdo através do átrio esquerdo aberto durante este período. Inicie a aquisição de dados e inicie o gotejamento de adenosina a 333 microlitros por minuto. Em seguida, conecte os fios de estimulação à caixa de estimulação e ajuste-a para 60 batimentos por minuto para estimulação de backup.
Se houver fibrilação, desfibrile o coração usando 30 pás JUULs. Uma vez que um ritmo organizado esteja presente, interrompa a ventilação manual e coloque eletrodos de eletrodo de eletrocardiograma diretamente no coração usando agulhas de gancho. Conecte a cânula de ângulo reto à porta atrial da câmara do órgão.
Uma vez conectado, clamp a cânula e solte o Hoffman clamp na linha entre o oxigenador e o reservatório de carga para permitir que o fluido entre no reservatório de carga. Em seguida, encha o reservatório de carregamento até que a pressão atinja 15 a 20 milímetros de mercúrio. Aumente a saída da bomba para manter a pressão aórtica e atrial.
Em seguida, insira metade da ponta de metal em ângulo reto no átrio esquerdo com a ponta apontando para o apêndice para promover a competência da válvula mitral. Insira o sensor de pressão dentro do ventrículo esquerdo para registrar a pressão ventricular esquerda. Depois disso, solte a pinça na cânula para permitir que o átrio esquerdo se encha.
Uma vez desaerado, use as suturas e as armadilhas de torniquete colocadas anteriormente para fechar completamente a abertura do átrio esquerdo. Ajuste a cânula e as armadilhas conforme necessário para minimizar o vazamento de fluido. Depois de prender a cânula no átrio esquerdo, prenda a linha do oxigenador à bolsa de windkessel para interromper completamente a perfusão retrógrada na aorta.
Finalmente, mova o gotejamento de adenosina da linha que leva à bolsa de windkessel para a linha entre o reservatório de carga e a porta atrial. A resistência vascular, a taxa de consumo de oxigênio, o acúmulo de lactato, o consumo de glicose e o acúmulo de potássio não apresentaram diferença estatística ao longo do período de perfusão. Da mesma forma, não foi observada diferença no peso ganho pelos enxertos.
No entanto, a frequência cardíaca dos enxertos com falha diminuiu constantemente após duas horas de tempo carregado, com a área sob a curva não mostrando diferença estatisticamente significativa até três horas de perfusão. Além disso, as métricas dependentes de carga sugeriram uma perda da função cardíaca já em 30 minutos de tempo de carga, com a medida de contratilidade sendo a primeira métrica a indicar uma perda de função. Assim como a frequência cardíaca, a pressão de pulso do ventrículo esquerdo diminuiu constantemente após duas horas de perfusão carregada, com diferenças estatisticamente significativas entre enxertos, pressão de pulso e relaxamento observados após 1,5 horas de perfusão.
