Para começar, adicione um mililitro de águia média basal a cada poço da placa de seis poços. E usando uma pinça estéril, coloque uma única inserção de cultura de células em cada poço. Incube a placa em uma incubadora de 37 graus Celsius, 5% de dióxido de carbono por no mínimo duas horas.
Após a instalação da área de dissecção dentro de uma capa biológica, lave as ferramentas cirúrgicas em etanol a 70%, seguido de PBS. Em seguida, posicione o animal sacrificado na área de dissecação e faça uma pequena incisão com uma tesoura longe do cerebelo para expor o cérebro. Usando uma pinça com pontas arredondadas, retire suavemente o crânio e remova-o em pequenos pedaços para evitar danificar o tecido cerebelar.
Exponha o tecido cerebral para extrair o cerebelo e desconecte os três pares de pedúnculos usando uma espátula de íris curva fina para separar o córtex cerebelar do tronco cerebral. Em seguida, deslize a espátula entre o cerebelo, o colículo superior e o tronco cerebral para recuperar o cerebelo.
