Para começar, obtenha o cerebelo de um filhote de rato de 10 dias em tampão de dissecação a frio. Depois de remover o excesso de tampão, posicione o cerebelo na plataforma de corte na orientação vertical. Realize o corte parassagital com uma espessura de corte de 350 micrômetros.
Separe delicadamente as fatias com uma espátula de íris fina e coloque-as em meio de dissecção a frio. Sob o binóculo, use duas espátulas de íris curvas para separar cuidadosamente as fatias de tecido uma da outra. Para culturas, use fatias derivadas do vermis cerebelar situado na zona corticonuclear medial do órgão.
Usando uma espátula larga, transfira cada fatia de tecido para uma inserção de cultura. Mova cada inserto carregando uma fatia de tecido para um poço na placa de seis poços contendo o meio pré-aquecido. Durante a incubação, aspirar o meio utilizado com uma pipeta de vidro estéril.
Usando uma pipeta sorológica de cinco mililitros, adicione um mililitro de águia média basal fresca com a ponta da pipeta encostada na parede do poço sem perturbar o tecido.
