Isolamento de mitocôndrias para análise de supercomplexos mitocondriais a partir de pequenas amostras de cultura de tecidos e células

Nossa pesquisa está focada em entender melhor a biogênese mitocondrial, em particular, a organização e regulação do Sistema OXPHOS, e também em definir o papel que as mitocôndrias desempenham em doenças que vão do câncer a distúrbios neurodegenerativos. As mitocôndrias desempenham papéis múltiplos e essenciais na célula, condicionando todo o seu metabolismo e sobrevivência. Estamos lentamente aumentando nosso conhecimento da complexidade mitocondrial e sua contribuição para os mecanismos de adaptação celular na saúde e na doença.

Contribuímos para estabelecer um novo modelo de organização para o sistema OXPHOS, o modelo de plasticidade que integra propostas anteriores e assume a coexistência de supercomplexos e complexos livres em diferentes proporções para otimizar sua função e permitir adaptações celulares. Nosso protocolo permite partir de pequenos tecidos ou amostras de cultura de células para obter quantidades suficientes de proteína mitocondrial para analisar a montagem e o status e função de supercomplexos por eletroforese nativa azul ou outras técnicas. Podemos fazer isso de forma reprodutível em pouco tempo com um equipamento simples e relativamente com baixos custos.