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Nous présentons une procédure pour former un poly (éthylène glycol) monocouche auto-assemblées (PEG-SAM) sur un substrat de silicium avec des microélectrodes d'or. Le PEG-SAM est formé en une seule étape et prévient l'encrassement biologique sur des surfaces de silicium et de l'or. L'électrophorèse est ensuite utilisé pour des biomolécules patterning jusqu'à l'échelle nanométrique.
Nous présentons une procédure pour former un poly (éthylène glycol) (PEG) triméthoxysilane monocouche auto-assemblées (SAM) sur un substrat de silicium avec des microélectrodes d'or. Le PEG-SAM est formé dans une étape d'assemblage simple et évite l'encrassement biologique sur des surfaces de silicium et de l'or. Le SAM est utilisé pour microélectrodes robe à motifs à la norme, positive-ton lithographie. Utilisation de la microtubules comme un exemple, nous appliquons une tension continue de provoquer la migration électrophorétique à l'électrode de SAM enduit de manière réversible. Une chambre d'écoulement est utilisé pour l'imagerie de la migration électrophorétique et de structuration des microtubules
Préparation des réactifs
Préparer un tampon PIPES (80 mM PIPES, 1 mM de MgCl2, 1 mM EGTA, ajusté à pH 6,8 avec KOH). Aliquoter et glucose oxydase magasin, la catalase et de glucose à -70 ° C et le taxol à -20 ° C selon les protocoles existants. Aliquoter et 1,2 tubuline conserver à -70 ° C selon les instructions fournies par le fournisseur.
Motif microélectrodes Au utilisant la lithographie
La migration des MTS est facilement visualisée en utilisant la microscopie à fluorescence en raison de leur luminosité et la fluorescence de fond faible. La méthode est généralement applicable à la structuration de biomolécules, comme il exige seulement que les biomolécules être amené à porter une charge nette par un ajustement approprié du pH tampon. L'électro-osmose est évitée dans cette configuration, car il n'ya pas de surfaces chargées tels que les murs de la silice utilisée en électropho.......
Nous reconnaissons Melissa Grunlan pour des discussions utiles sur la formation de SAM. Cette recherche a été financée en partie par la Fondation Robert A. Welch (A-1585).
....N ° 1 des lamelles de verre borosilicate (22 x 50 mm) ont été achetés auprès de VWR. Poli de qualité électronique de type p <111> des plaquettes de silicium ont été achetés auprès d'Addison Engineering, Inc haute pureté peinture argentée a été obtenu à partir de structure de la sonde, Inc (Catalogue # 5001 AB). Isolé fil fin en cuivre de calibre aimants (~ 0,08 mm (0,003) de diamètre) peuvent être obtenus auprès de sociétés d'approvisionnement électronique.
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