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Summary

Wir präsentieren ein Verfahren zur Bildung eines Poly (Ethylenglycol) selbstorganisierte Monoschicht (PEG-SAM) auf einem Silizium-Substrat mit Gold-Mikroelektroden. Die PEG-SAM ist in einem einzigen Schritt gebildet und verhindert Biofouling auf Silizium-und Goldoberflächen. Die Elektrophorese wird dann für die Strukturierung von Biomolekülen bis in den Nanobereich eingesetzt.

Abstract

Wir präsentieren ein Verfahren zur Bildung eines Poly (ethylenglycol) (PEG) trimethoxysilan selbstorganisierten Monoschicht (SAM) auf einem Silizium-Substrat mit Gold-Mikroelektroden. Die PEG-SAM ist in einer einzigen Versammlung Schritt gebildet und verhindert Biofouling auf Silizium-und Goldoberflächen. Die SAM ist die Beschichtung Mikroelektroden mit Standard-, Positiv-Ton-Lithographie strukturiert werden. Mit der Mikrotubuli als Beispiel verwenden wir eine Gleichspannung an elektrophoretische Migration auf die SAM-beschichteten Elektrode in einer reversiblen Weise zu induzieren. Eine Flusskammer ist für die Bildgebung der elektrophoretischen Migration und Mikrotubuli-Strukturierung eingesetzt

Protocol

Vorbereitung der Reagenzien

Bereiten PIPES-Puffer (80 mM PIPES, 1 mM MgCl 2, 1 mM EGTA, eingestellt auf pH 6,8 mit KOH). Aliquotieren und lagern Glucose-Oxidase, Catalase und Glucose bei -70 ° C und Taxol bei -20 ° C nach den bestehenden Protokollen. 1,2 aliquotieren und lagern Tubulin bei -70 ° C gemäß den Anweisungen des Lieferanten enthalten.

Pattern Au-Mikroelektroden mit Lithographie

  1. Cut Silizium-Wafern in 1 cm '1,5 cm.......

Discussion

Die Migration von MTS ist einfach visualisiert mittels Fluoreszenz-Mikroskopie aufgrund ihrer Helligkeit und der geringe Hintergrundfluoreszenz. Die Methode ist allgemein anwendbar auf Biomolekül Strukturierung, wie es verlangt nur, dass die Biomoleküle bewogen, eine Nettoladung durch eine geeignete Einstellung des pH tragen. Elektroosmose ist in dieser Konfiguration zu vermeiden, weil es keine geladenen Oberflächen wie z. B. die Kieselsäure Wände in der Kapillarelektrophorese eingesetzt werden.

Acknowledgements

Wir erkennen an, Melissa Grunlan für hilfreiche Diskussionen über SAM-Bildung. Diese Arbeit wurde zum Teil durch die Robert A. Welch Foundation (A-1585) unterstützt.

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Materials

Nr. 1 Borosilikatglas Deckgläser (22 X 50 mm) wurden von VWR erworben. Polierte electronic grade p-Typ <111> Silizium-Wafer wurden von Addison Engineering, Inc. erworben Hochreine Silberfarbe von Structure Probe, Inc. (Katalog # 5001 AB) erhalten. Isolierte Feinstrick Kupfer Lackdraht (~ 0,08 mm (0,003) Durchmesser) können von der elektronischen Zulieferunternehmen bezogen werden.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).
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