Antivegetativa monostrati auto-assemblati su microelettrodi per Biomolecole Patterning

Summary

Vi presentiamo una procedura per la formazione di un poli (glicole etilenico) auto-assemblati monostrato (PEG-SAM) su un substrato di silicio con microelettrodi d'oro. Il PEG-SAM è formato in un unico passaggio ed evita biofouling sulle superfici di silicio e oro. Elettroforesi viene quindi utilizzato per biomolecole patterning fino alla scala nanometrica.

Abstract

Vi presentiamo una procedura per la formazione di un poli (glicole etilenico) (PEG) trimetossisilano monostrato auto-assemblato (SAM) su un substrato di silicio con microelettrodi d'oro. Il PEG-SAM si forma in un passo unico assembly ed evita biofouling sulle superfici di silicio e oro. La SAM è utilizzato per microelettrodi cappotto fantasia con lo standard, positivo-tono litografia. Utilizzando il microtubulo come esempio, si applica una tensione continua di indurre la migrazione elettroforetica al SAM-elettrodo rivestito in modo reversibile. Una camera di flusso viene utilizzato per l'imaging e la migrazione elettroforetica patterning microtubuli

Protocol

Preparazione dei reagenti

Preparare tampone TUBI (80 TUBI mM, 1 mM MgCl _2, 1mM EGTA, portato a pH 6,8 con KOH). Aliquota e glucosio ossidasi negozio, la catalasi e il glucosio a -70 ° C e taxolo a -20 ° C secondo i protocolli esistenti. ^1,2 Aliquotare e tubulina conservare a -70 ° C secondo le istruzioni fornite dal fornitore.

Modello microelettrodi Au utilizzando la litografia

1. Tagliare wafer di silicio in 1,5 1 cm 'substrati.......

Discussion

La migrazione di MTS è facilmente visualizzabile usando la microscopia a fluorescenza per la loro luminosità e la fluorescenza di fondo basso. Il metodo è generalmente applicabile a patterning biomolecole, in quanto richiede solo che il biomolecole essere indotto a portare un onere netto di regolazione adeguata del pH del buffer. Elettroosmosi è evitato in questa configurazione perché non ci sono superfici di carico, come le pareti di silice utilizzata in elettroforesi capillare.

Divers.......

Materials