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Nós apresentamos um procedimento para a formação de um poli (etileno glicol) monocamada auto-montados (PEG-SAM) em um substrato de silício com microeletrodos de ouro. O PEG-SAM é formada em uma única etapa e impede a incrustação em superfícies de silício e ouro. Eletroforese é então utilizado para padronização biomoléculas até a nanoescala.
Nós apresentamos um procedimento para a formação de um poli (etileno glicol) (PEG) monocamada auto-montados trimetoxissilano (SAM) em um substrato de silício com microeletrodos de ouro. O PEG-SAM é formado em uma etapa única montagem e impede a incrustação em superfícies de silício e ouro. A SAM é usada para microeletrodos casaco estampados com a norma, litografia tom positivo. Usando o microtúbulos como um exemplo, nós aplicamos uma tensão DC para induzir a migração eletroforética para o eletrodo revestido SAM de forma reversível. A câmara de fluxo é usado para geração de imagens a migração eletroforética e padronização de microtúbulos
Preparação de reagentes
Prepare TUBOS tampão (80 mM PIPES, 1mM MgCl 2, 1 mM EGTA, ajustado para pH 6,8 com KOH). Alíquotas e armazenar glicose oxidase, catalase e glicose a -70 ° C e taxol a -20 ° C de acordo com protocolos existentes. 1,2 alíquotas e tubulina armazenar a -70 ° C de acordo com as instruções fornecidas pelo fornecedor.
Microeletrodos padrão de Au utilizando litografia
A migração dos MTs é facilmente visualizado através de microscopia de fluorescência por causa de seu brilho e da fluorescência de fundo baixa. O método é geralmente aplicável a padronização biomolécula, uma vez que só exige que as biomoléculas ser induzido a levar uma carga líquida pelo ajuste adequado do pH. Eletroosmose é evitada nesta configuração, porque não há superfícies carregadas como as paredes de sílica usada em eletroforese capilar.
Várias modificações des.......
Reconhecemos Melissa Grunlan para discussões úteis sobre a formação de SAM. Esta pesquisa foi suportada em parte pela A. Robert Welch Foundation (A-1585).
....No. 1 vidro borossilicato lamelas (22 X 50 mm) foram adquiridos da VWR. Polido de grade eletrônico do tipo p <111> wafers de silício foram adquiridos da Addison Engineering, Inc. alta pureza pintura prata foi obtida a partir Estrutura Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Duplas multa bitola imã cobre (~ 0,08 milímetros (0,003) de diâmetro) podem ser obtidos a partir de empresas de abastecimento eletrônicos.
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