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Summary

Se presenta un procedimiento para la formación de un poli (etilenglicol) auto-ensambladas monocapa (PEG-SAM) en un substrato de silicio con microelectrodos de oro. El PEG-SAM se forma en un solo paso y evita la contaminación biológica en las superficies de silicio y oro. Electroforesis se utiliza para modelar biomoléculas a la nanoescala.

Abstract

Se presenta un procedimiento para la formación de un poli (etilenglicol) (PEG) trimetoxisilano auto-ensambladas monocapa (SAM) en un substrato de silicio con microelectrodos de oro. El PEG-SAM se forma en una etapa de montaje simple y evita incrustaciones en las superficies de silicio y oro. El SAM se utiliza para microelectrodos abrigo estampado con el estándar, de tono positivo litografía. El uso de los microtúbulos como ejemplo, se aplica un voltaje de DC para inducir la migración electroforética al electrodo SAM recubiertos de una manera reversible. Una cámara de flujo se utiliza para obtener imágenes de la migración y los patrones de electroforesis de microtúbulos

Protocol

Preparación de los reactivos

Preparar tampón PIPES (80 TUBOS mM, 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA, ajustada a pH 6,8 con KOH). Alícuota y almacenar la glucosa oxidasa, catalasa y glucosa a -70 ° C y taxol a -20 ° C de acuerdo con los protocolos existentes. 1,2 alícuotas y la tubulina almacenar a -70 ° C de acuerdo con las instrucciones que se incluyen por el proveedor.

Au microelectrodos patrón utilizando la litografía

  1. Corte de obleas.......

Discussion

La migración de MT es fácil de visualizar mediante microscopía de fluorescencia debido a su brillo y la fluorescencia de fondo bajo. El método es aplicable en general a los patrones de biomoléculas, ya que sólo se requiere que las biomoléculas ser inducidos a realizar un cargo neto por el ajuste adecuado del pH. Electroósmosis se evita en esta configuración, porque no hay superficies cargadas, tales como las paredes de sílice utilizado en electroforesis capilar.

Varias modificacion.......

Acknowledgements

Reconocemos Melissa Grunlan útil para los debates sobre la formación de SAM. Esta investigación fue financiada en parte por la Fundación Robert A. Welch (A-1585).

....

Materials

No. 1 de vidrio de borosilicato cubreobjetos (22 x 50 mm) fueron adquiridos de VWR. Pulido grado electrónico de tipo p <111> obleas de silicio fueron adquiridos de Addison Engineering, Inc. de alta pureza pintura de plata fue obtenida de Structure Probe, Inc. (Catálogo # 5001 AB). Aislado de cobre fino calibre imán (~ 0,08 mm (0,003 pulgadas) de diámetro) se puede obtener de las compañías de componentes electrónicos.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).
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