Antifouling zelf-geassembleerde monolagen op micro-elektroden voor Patterning Biomoleculen

Summary

We presenteren een procedure voor het vormen van een poly (ethyleenglycol) zelf-geassembleerde monolaag (PEG-SAM) op een silicium substraat met gouden micro-elektroden. De PEG-SAM is gevormd in een enkele stap en voorkomt biofouling op silicium en goud oppervlakken. Elektroforese wordt dan gebruikt voor patronen biomoleculen naar de nanoschaal.

Abstract

We presenteren een procedure voor het vormen van een poly (ethyleenglycol) (PEG) trimethoxysilaan zelf-geassembleerde monolaag (SAM) op een silicium substraat met gouden micro-elektroden. De PEG-SAM is gevormd in een assemblage stap en voorkomt biofouling op silicium en goud oppervlakken. De SAM is gebruikt voor het bekleden micro-elektroden patroon met standaard, positieve-tone lithografie. Met behulp van de microtubule als een voorbeeld, passen we een DC-spanning op elektroforetische migratie ertoe te brengen de SAM-gecoate elektrode in een omkeerbare manier. Een stroom kamer wordt gebruikt voor beeldvorming van de elektroforetische migratie en microtubuli patronen

Protocol

Bereiding van reagentia

Bereid LEIDINGEN buffer (80 mm buizen, 1 mM _MgCl2, 1 mM EGTA, ingesteld op een pH 6,8 met KOH). Aliquot en op te slaan glucose-oxidase, catalase en glucose bij -70 ° C en taxol bij -20 ° C volgens bestaande protocollen. ^1,2 Aliquot en bewaar tubuline bij -70 ° C volgens de instructies die door de leverancier.

Patroon met behulp van micro-elektroden Au lithografie

1. Snijd silicium wafers in 1 cm "1,5 cm .......

Discussion

De migratie van MT's is eenvoudig gevisualiseerd met behulp van fluorescentie microscopie door hun helderheid en de lage achtergrond fluorescentie. De methode is algemeen van toepassing op biomolecuul patronen, omdat het alleen vereist dat de biomoleculen worden geïnduceerd met een netto lading te dragen door een geschikte aanpassing van de buffer pH. Elektro is vermeden in deze opstelling, omdat er geen geladen oppervlakken, zoals de silica muren gebruikt in de capillaire elektroforese.

Materials