Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Summary

Vi presenterar ett förfarande för att bilda en poly (etylenglykol) egna sammansatta cellslager (PEG-SAM) på ett kiselsubstrat med guld microelectrodes. PEG-SAM bildas i ett enda steg och förhindrar påväxt på kisel och guld ytor. Elektrofores används sedan för mönstring biomolekyler ner till nanoskala.

Abstract

Vi presenterar ett förfarande för att bilda en poly (etylenglykol) (PEG) trimethoxysilane egna sammansatta monolager (SAM) på ett kiselsubstrat med guld microelectrodes. PEG-SAM bildas i en enda församling steg och förhindrar påväxt på kisel och guld ytor. SAM används för att bestryka microelectrodes mönstrade med standard, positiv-tone litografi. Använda mikrotubuli som ett exempel, tillämpar vi en DC-spänning för att förmå elektrofores migration till SAM-belagda elektroden i ett reversibelt sätt. Ett flöde kammare används för avbildning av elektrofores migration och mikrotubuli mönstring

Protocol

Beredning av reagenser

Förbered RÖR buffert (80 mm rör, 1mm MgCl 2, 1mm EGTA, justerat till pH 6,8 med KOH). Alikvotera och lagra glukos oxidas, katalas och glukos vid -70 ° C och Taxol vid -20 ° C enligt befintliga protokoll. 1,2 Alikvotera och lagra tubulin vid -70 ° C enligt instruktionerna från leverantören.

Mönster Au microelectrodes med litografi

  1. Skär kiselskivor i 1 cm-1,5 cm substrat med hjälp av en skrivare eller.......

Discussion

Migration av MTS är enkelt visualiseras med fluorescensmikroskopi på grund av deras ljusstyrka och den låga bakgrundsfluorescens. Metoden är generellt tillämplig på biomolekyler mönstring, eftersom den bara kräver att biomolekyler förmås att bära ett netto kostnad av lämplig justering av pH. Electroosmosis undviks i denna konfiguration, eftersom det inte finns några laddade ytor såsom kiseldioxid väggarna används i kapillärelektrofores.

Flera ändringar av denna metod är m?.......

Acknowledgements

Vi erkänner Melissa Grunlan för bra diskussioner om SAM-formation. Denna forskning stöds delvis av Robert A. Welch Foundation (A-1585).

....

Materials

Nr 1 borosilikatglas täckglas (22 x 50 mm) köptes från VWR. Polerad elektroniska betyg P-typ <111> kiselskivor köptes från Addison Engineering, Inc. hög renhetsgrad silver färg erhölls från Struktur Probe, Inc. (Catalog # 5001 AB). Isolerad fina mätare koppar magnet tråd (~ 0,08 mm (0,003) i diameter) kan erhållas från elektroniska energiverken.

References

  1. Rai-Choudhury, P. . Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography. , (1997).
....

This article has been published

Video Coming Soon

We use cookies to enhance your experience on our website.

By continuing to use our website or clicking “Continue”, you are agreeing to accept our cookies.

Learn More