L'uso di diacetato Carboxyfluorescein succinimidile Ester (CFSE) per monitorare la proliferazione dei linfociti

Carboxyfluorescein succinimidile estere (CFSE) è un mezzo efficace e popolare per il monitoraggio dei linfociti divisione ^1-3. CFSE etichette covalentemente molecole intracellulari di lunga durata con il colorante fluorescente, carboxyfluorescein. Così, quando una cellula si divide CFSE marcato, la sua progenie sono dotati di metà il numero di carboxyfluorescein-tagged molecole e quindi ogni divisione cellulare può essere valutata misurando la corrispondente diminuzione della fluorescenza cellulare tramite citometria a flusso. La capacità di CFSE di etichettare popolazioni di linfociti con fluorescenza ad alta intensità di variazione eccezionalmente basso, insieme alla sua bassa tossicità delle cellule, ne fanno un colorante ideale per misurare la divisione cellulare. Dal momento che si tratta di un colorante a base di fluorescina è anche compatibile con una vasta gamma di fluorocromi altri che lo rende applicabile a più colori citometria a flusso. In questo articolo vengono descritte le procedure normalmente utilizzate per l'etichettatura dei linfociti del mouse al fine di monitorare fino a 8 divisioni cellulari. Queste cellule marcate possono essere utilizzati sia in vitro e in vivo.