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Immunology and Infection

El uso de diacetato de carboxifluoresceína Ester succinimidil (CFSE) para controlar la proliferación de linfocitos

Published: October 12th, 2010

DOI:

10.3791/2259

1Department of Immunology, John Curtin School of Medical Research, Australian National University

Carboxifluoresceína succinimidil ester (CFSE) es un medio eficaz y popular para controlar la división de linfocitos 1-3. CFSE etiquetas covalentemente moléculas de larga vida intracelular con el colorante fluorescente, carboxifluoresceína. Por lo tanto, cuando una célula se divide CFSE marcado, todos sus descendientes están dotados de la mitad del número de carboxifluoresceína etiquetados con las moléculas y por lo tanto cada división celular se puede evaluar midiendo la correspondiente disminución de la fluorescencia celular mediante citometría de flujo. La capacidad de la CFSE para etiquetar las poblaciones de linfocitos, con una alta intensidad de fluorescencia de la varianza excepcionalmente bajo, unido a su baja toxicidad celular, lo convierten en un medio de contraste ideal para medir la división celular. Ya que es un colorante de fluoresceína basado también es compatible con una amplia gama de fluorocromos otros por lo que es aplicable a la citometría de flujo multi-color. En este artículo se describen los procedimientos normalmente utilizados para el etiquetado de linfocitos de ratón con el propósito de monitorear hasta ocho divisiones celulares. Estas células marcadas se pueden utilizar tanto para la in vitro e in vivo.

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