Abstract
Immunology and Infection
Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) är ett effektivt och populärt sätt att övervaka lymfocyter division 1-3. CFSE etiketter kovalent långlivade intracellulära molekyler med fluorescerande färg, carboxyfluorescein. Så när en CFSE-märkt cell delar sig, är dess avkomma utrustade med hälften av antalet carboxyfluorescein taggade-molekyler och därmed varje celldelning kan bedömas genom att mäta motsvarande minskning i cell fluorescens via flödescytometri. Kapaciteten i CFSE att märka lymfocytpopulationer med hög fluorescerande intensitet exceptionellt låg varians i kombination med dess låga celltoxicitet, gör den till en idealisk färgämne för att mäta celldelning. Eftersom det är en fluorescein-baserad färg det är också kompatibel med ett brett utbud av andra fluorokromer gör det som gäller för flera färger flödescytometri. Den här artikeln beskriver de förfaranden som normalt används för märkning mus lymfocyter för att övervaka upp till 8 celldelningar. Dessa är märkta celler kan användas för både in vitro och in vivo-studier.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved