Levende Imaging af GFP-mærkede proteiner i

Drosophila oocyt er blevet oprettet som et alsidigt system til undersøgelse grundlæggende spørgsmål såsom cytoskeletal funktion, celle organisation, og organel struktur og funktion. Tilgængeligheden af ​​forskellige GFP-mærkede proteiner betyder, at mange cellulære processer kan overvåges i levende celler i løbet af minutter eller timer, og anvendelse af denne teknik, har processer såsom RNP transport, epithelial morfogenese, og vævsremodellering blevet beskrevet meget detaljeret i Drosophila oocytter ^1,2.

Evnen til at udføre video imaging kombineret med et rigt repertoire af mutanter gør en imponerende vifte af gener og processer, der skal undersøges med utrolige detaljer. Et sådant eksempel er processen med ooplasmic streaming, som begynder ved midten oogenesen ^3,4. Denne energisk bevægelse af cytoplasmiske vesikler er mikrotubuli og kinesin-afhængig ⁵ og giver en nyttig sysmet til at undersøge cytoskeleton funktion på disse stadier.

Her vil jeg præsentere en protokol for tid bortfalder billeddannelse af levende oocytter bruger stort set alle konfokal mikroskopi setup.