Isolamento e la coltura di astrociti corticali mouse

Gli astrociti sono un tipo di cellula abbondante nel cervello dei mammiferi, ma resta ancora molto da imparare sulle loro caratteristiche molecolari e funzionali. Nei sistemi di coltura in vitro di cellule astrociti possono essere utilizzati per studiare le funzioni biologiche di queste cellule gliali in dettaglio. Questo protocollo video mostra come ottenere astrociti puri di isolamento e la coltura di cellule corticali miste di cuccioli di topo. Il metodo si basa sulla mancanza di neuroni vitali e la separazione di astrociti, oligodendrociti e microglia, le tre popolazioni principali cellule gliali del sistema nervoso centrale, in coltura. Immagini rappresentative durante i primi giorni di cultura dimostrare la presenza di una popolazione cellulare mista e indicare il timepoint, quando astrociti diventano confluenti e devono essere separati da microglia e gli oligodendrociti. Inoltre, abbiamo dimostrato la purezza e la morfologia degli astrociti di astrociti in coltura utilizzando colorazioni immunocitochimiche per la consolidata eappena descritto marcatori astrociti. Questo sistema di coltura può essere facilmente utilizzato per ottenere astrociti topo puri e astrociti terreno condizionato per studiare vari aspetti della biologia astrociti.