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Neuroscience

C57BL / 6マウスにおける妊娠中のアルコール誘発性アポトーシスに対する神経栄養ペプチドの効果をテストするための実験方法、ADNF-9、

Published: April 24th, 2013

DOI:

10.3791/50092

1Department of Pharmacology, College of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, University of Toledo

胎児の脳の成長の初期胚の段階で出生前のアルコール暴露の影響を調査するための実験的なデザインが挑戦しています。これは主に胎児の脳の顕微解剖の難しさとアルコールへの出生前暴露により引き起こされるアポトーシス細胞の決定のためにそれらの切片によるものです。実験では、胎児の脳組織における細胞死の同定に繁殖マウスから可視化技術を提供ここで説明する。この研究は、C57BL /胎児のアルコール暴露とアルコール誘発性アポトーシスに対する栄養ペプチドの役割を研究するための動物モデルとして6マウスを使用していました。繁殖は、胚の年齢の正確な段階を決定するために、2時間マットウィンドウで構成されています。確立された胎児のアルコール暴露モデルは、胎児の脳における出生前のアルコール暴露の影響を決定するために、この研究で使用されている。これは、妊娠マウスのために栄養素の唯一の供給源としてアルコールやペアフィード流動食への無料アクセスが含まれます。

アポトーシスを調べるために、胎児の脳を第ビブラトーム切片装置との剥離を容易にするために、離れて金型を用いて、ゼラチンに埋め込まれている。パラホルムアルデヒドに埋め込まれ、固定された胎児の脳を容易に区画され、遊離浮遊切片は、アポトーシスまたは細胞死の決定のためsuperfrostプラススラ​​イドに装着することができる。

TUNEL(TdTを媒介性dUTPニック末端標識、TdTを:ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ)アッセイは、細胞死またはアポトーシス細胞を同定するために使用されている。これは、APのことは注目に値するoptosisおよび細胞媒介性細胞傷害性は、DNAの断片化によって特徴付けられる。したがって、可視TUNEL陽性細胞は、細胞死またはアポトーシス細胞を示す。

ここで実験的なデザインは、アルコールと胎児の脳内妊娠中神経ペプチドの役割の効果を研究するための確立された流動食の使用に関する情報を提供します。これは、繁殖と妊娠マウスを供給する、胎児の脳をmicrodissecting、およびアポトーシスを決定することを含む。一緒に、これらのビジュアルとテキスト技術は胎児の脳中の有害物質の胎児期曝露を調査するための源であるかもしれません。

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