से मस्तिष्क तनहा Leukocytes का अलगाव विश्लेषण

हम अलगाव और पी. के मस्तिष्क रक्त वाहिकाओं से पक्षपाती भड़काऊ कोशिकाओं के लक्षण वर्णन के लिए एक विधि का वर्णन berghei ANKA संक्रमित चूहों. प्रयोगात्मक मस्तिष्क मलेरिया की प्रेरण, एक neurologic सिंड्रोम में इस परजीवी तनाव परिणामों के साथ अतिसंवेदनशील माउस उपभेदों के संक्रमण recapitulates प्लाज्मोडियम फाल्सीपेरम की मध्यस्थता मनुष्य के ^1,2 में गंभीर मलेरिया के कुछ महत्वपूर्ण पहलुओं कि. परिपक्व रक्त चरण मलेरिया की रूपों संक्रमित एरिथ्रोसाइट, जो उन्हें संवहनी endothelial कोशिकाओं को बाध्य करने के लिए अनुमति देता है की सतह पर परजीवी प्रोटीन व्यक्त करते हैं. इस प्रक्रिया में रक्त के प्रवाह में अवरोधों लाती है, जिसके परिणामस्वरूप hypoxia और ³ haemorrhages में और भी परजीवी ज़ब्ती की साइट पर भड़काऊ leukocytes की भर्ती को बढ़ावा देने.

अन्य संक्रमण, यानी neutrotopic ^4-6 वायरस के विपरीत, दोनों मलेरिया parasitized लाल रक्त कोशिकाओं (pRBC) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से जुड़े inflammatory leukocytes रक्त वाहिकाओं के बजाय भीतर मस्तिष्क पैरेन्काइमा घुसपैठ से तनहा रहते हैं. इस प्रकार की गैर भड़काऊ परिसंचारी कोशिकाओं, संक्रमित चूहों के व्यापक intracardial छिड़काव अंग निष्कर्षण और ऊतक प्रसंस्करण के लिए पहले के साथ तनहा leukocytes के संक्रमण से बचने के लिए इस प्रक्रिया में रक्त डिब्बे को हटाने की आवश्यकता है. छिड़काव के बाद, दिमाग और खेती कर रहे हैं और छोटे - छोटे टुकड़ों में dissected. ऊतक संरचना Collagenase विकास और DNase मैं के साथ enzymatic उपचार से बाधित है जिसके परिणामस्वरूप मस्तिष्क homogenate तो एक Percoll ढाल है कि मस्तिष्क तनहा leukocytes की myelin और अन्य ऊतकों मलबे से जुदाई (BSL) की अनुमति देता है पर centrifuged है. पृथक कोशिकाओं को फिर धोया जाता है, प्रवाह cytometry द्वारा बाद के विश्लेषण के लिए एक और फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी के साथ hemocytometer दाग गिनती का उपयोग.

इस प्रक्रिया भड़काऊ leukocytes के व्यापक प्ररूपी लक्षण वर्णन पुनः में दिमाग की ओर पलायन करने की अनुमति देता हैस्ट्रोक के रूप में के रूप में अच्छी तरह से वायरल या परजीवी के संक्रमण सहित विभिन्न stimuli, sponse. विधि भी पूर्व नैदानिक ​​पशु मॉडल में उपन्यास विरोधी भड़काऊ उपचार के मूल्यांकन के लिए एक उपयोगी उपकरण प्रदान करता है.