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Biology

Collecte, l'isolement et l'enrichissement des bactéries présentes naturellement magnétotactique de l'Environnement

Published: November 15th, 2012

DOI:

10.3791/50123

1School of Earth Sciences, The Ohio State University, 2School of Environment & Natural Resources, The Ohio State University, 3Institute of Geology and Geophysics, Chinese Academy of Sciences

Bactéries magnétotactique Tout Terrain (VTT) sont des micro-organismes aquatiques qui ont d'abord été décrits notamment en 1975 1 à partir d'échantillons de sédiments prélevés dans les marais salants de Massachusetts (USA). Depuis VTT ont été découverts dans l'eau et stratifiés sédiments colonnes de partout dans le monde 2. Une caractéristique commune à tous les VTT, c'est qu'ils contiennent magnétosomes, qui sont intracellulaires, nanocristaux liée à la membrane magnétique de la magnétite (Fe 3 O 4) et / ou greigite (Fe 3 S 4) ou les deux 3, 4. Dans l'hémisphère Nord, VTT sont généralement attirés vers l'extrémité sud d'un aimant, tandis que dans l'hémisphère sud, ils sont généralement attirés vers l'extrémité nord d'un aimant 3,5. Cette propriété peut être exploitée lors de la tentative d'isoler VTT à partir d'échantillons environnementaux.

Une des façons les plus courantes pour enrichir VTT est d'utiliser un récipient en plastique transparent pour collecter des sédiments et de l'eau d'une source naturelle,comme un bassin d'eau douce. Dans l'hémisphère Nord, l'extrémité sud d'un aimant est placé sur le côté extérieur du récipient juste au-dessus du sédiment à l'interface eau-sédiments. Après un certain temps, la bactérie peut être retiré de l'intérieur du récipient à proximité de l'aimant à la pipette et ensuite enrichie en outre par l'utilisation d'un circuit capillaire 6 et un aimant. Une fois enrichi, les bactéries peuvent être placées sur une lame de microscope en utilisant une méthode de la goutte suspendue et observées dans un microscope optique ou déposée sur une grille de cuivre et observées par microscopie électronique à transmission (MET).

En utilisant cette méthode, isolé VTT peuvent être étudiées au microscope pour déterminer des caractéristiques telles que le comportement natatoire, le type et le numéro de la morphologie cellulaire flagelles, des cellules, la forme des cristaux magnétiques, le nombre de magnétosomes, le nombre de chaînes magnétosome dans chaque cellule, la composition de les cristaux nanomineral, et la présence de vacuoles intracellulaires.

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