Génération de rats transgéniques par voie topique

Électroporation in utero (IUE) est une technique qui permet la modification génétique de cellules dans le cerveau pour étudier le développement neuronal. Jusqu'à présent, l'utilisation de l'IUE pour étudier le comportement ou la neuropathologie dans le cerveau adulte a été limitée par des méthodes insuffisantes pour la surveillance de l'IUE succès de la transfection par des techniques non-invasives chez les animaux postnatales.

Pour la présente étude, des rats ont été utilisés pour E16 IUE. Après l'injection intra-ventriculaire des acides nucléiques dans les embryons, le positionnement des électrodes de la pince était critique pour le ciblage ou l'autre développement du cortex ou de l'hippocampe.

Ventriculaire co-injection et l'électroporation d'un gène de la luciférase a permis la surveillance des cellules transfectées après la naissance, après injection intra-péritonéale de la luciférine dans le P7 direct pup anesthésiés par bioluminescence in vivo, en utilisant un dispositif IVIS spectre avec un logiciel de quantification 3D. gène DISC1 humain de pleine longueur dans le cortex de rat a entraîné une hypersensibilité amphétamine. GFP co-transfectées a pu être détectée dans les neurones post-mortem par microscopie à fluorescence dans cryosections indiquant l'expression des gènes présents à ≥ 6 mois après la naissance.

Nous concluons que l'imagerie par bioluminescence postnatale permet d'évaluer le succès de transfections transitoires avec IUE chez les rats. Enquêtes sur l'influence des manipulations génétiques d'actualité pendant neurodevelopment sur le cerveau adulte et sa connectivité sont grandement facilitée. Pour de nombreuses questions scientifiques, cette technique peut compléter ou même remplacer l'utilisation de rats transgéniques et de fournir une nouvelle technologie pour les neurosciences comportementales.