Abstract
Medicine
Parada cardíaca seguido de reposição muitas vezes resulta em danos cerebrais dramática causada por isquemia e reperfusão posterior do cérebro. Isquemia cerebral global produz dano para regiões específicas do cérebro revelaram estar altamente sensíveis à isquemia 1. Neurónios do hipocampo têm maior sensibilidade a insultos isquémicos em comparação a outras populações de células, e, especificamente, na região CA1 do hipocampo, é particularmente vulnerável a lesão de isquemia / reperfusão 2.
O desenho das intervenções terapêuticas, ou estudo dos mecanismos envolvidos nos danos cerebrais, exige um modelo que produz danos similares aos do estado clínico e de uma forma reproduzível. Oclusão do vaso carótida bilateral com hipotensão (2VOH) é um modelo que produz isquemia do prosencéfalo reversível, emulando os eventos cerebrais que podem ocorrer durante a parada cardíaca e ressuscitação. Descrevemos aqui um modelo modificado de Smith et ai. (1984) 2, Como apresentado pela primeira vez em sua forma atual em Sanderson et al. (2008) 3, que gera lesão reprodutível para seletivamente regiões cerebrais vulneráveis 3-6. A confiabilidade deste modelo é ditada pelo controle preciso da pressão arterial sistêmica durante hipotensão aplicada, o tempo de isquemia, controle de temperatura perto, um regime de anestesia específico, e diligente cuidados pós-operatórios. Um insulto isquémico 8 minutos produz a morte celular dos neurónios CA1 do hipocampo, que progride ao longo de 6 a 24 horas de reperfusão, enquanto que as regiões do cérebro menos vulneráveis são poupados. Esta morte celular progressiva é facilmente quantificada após 7-14 dias após reperfusão, com uma perda quase total de neurónios CA1 é evidente nesta altura.
Em adição a este modelo de lesão cerebral, apresentamos um método para quantificação de dano CA1 usando um método simples, mas completa, a metodologia. Importante, a quantificação pode ser realizada utilizando um microscópio de câmara simples montado, umada livre ImageJ (NIH) plug-in de software, eliminando a necessidade de programas de software estereologia custo proibitivo e um palco motorizado microscópica para avaliação dos danos.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved