Naiv Vuxna stamceller Isolering från primära humana fibroblastkulturer

Under det senaste decenniet har flera vuxna stamceller har identifierats i human hud ^1-4. Isoleringen av multipotenta vuxna dermal prekursorer rapporterades först av Miller F. D laboratoriet ^{5, 6.} Dessa tidiga studier beskrivs en multipotent befolkning prekursorcell från vuxna däggdjur dermis ^5. Dessa celler - kallade SKPs, för hud-härledda prekursorer - isolerades och expanderades från gnagare och mänsklig hud och differentieras till både neurala och mesodermal avkomma, inklusive celltyper aldrig hittats i huden, till exempel nervceller ^5. Immunocytokemiska studier på odlade SKPs avslöjade att celler uttryckte vimentin och nestin, ett mellanliggande filament protein uttryckt i neurala och skelettmuskel prekursorer, förutom fibronektin och multipotenta stamceller markörer cellen ^6. Hittills har de adulta stamceller befolkningen SKPs isolerats från nyuppsamlade däggdjur hudbiopsier. ve_content "> Nyligen har vi etablerat och rapporterade att en population av hud härledda prekursorceller kan finnas kvar i primära fibroblastkulturer etablerade från hudbiopsier ^7. Antagandet att några somatiska stamceller kan bosätta sig i primära fibroblastkulturer vid tidiga populationsfördubblingar var bygger på följande iakttagelser: (1) SKPs och primära kulturer fibroblaster härstammar från dermis, och därmed ett litet antal SKP celler kan finnas kvar i primära dermala fibroblastkulturer och (2) primära fibroblastkulturer vuxit från frysta portioner som har varit utsätts för ogynnsamma temperatur under lagring eller överföring innehöll ett litet antal celler som förblev lönsamt ^7. Dessa sällsynta celler kunde expandera och kunde passera flera gånger. Denna observation föreslog att ett litet antal celler med hög spridning potens och motståndskraft mot stress var närvarande i humana fibroblastkulturer ^7.

Vi drog fördel av dessa resultat att upprätta ett protokoll för snabb isolering av adulta stamceller från primära fibroblastkulturer som är lätt tillgängliga från vävnad banker runt om i världen (figur 1). Denna metod har viktig betydelse eftersom den möjliggör isolering av prekursorceller när hudprover är inte tillgängliga när fibroblastkulturer kan vara tillgängliga från vävnadsbanker, alltså, öppnar nya möjligheter för att dissekera de molekylära mekanismerna bakom sällsynta genetiska sjukdomar samt sjukdomar modellering i en skålen.