Abstract
Neuroscience
Steeds genetisch gecodeerde hulpmiddelen steeds beschikbaar waarmee non-invasieve manipulatie van de neurale activiteit van specifieke neuronen in Drosophila melanogaster 1. De belangrijkste zijn optogenetic tools, die de activering of silencing van specifieke neuronen in de intact en vrij bewegende dieren met behulp van helder licht mogelijk te maken. Channelrhodopsin (ChR2) is een door licht geactiveerde kation kanaal dat, wanneer geactiveerd door blauw licht, veroorzaakt depolarisatie van neuronen die het uit te drukken. ChR2 effectief is geweest voor het identificeren van neuronen van cruciaal belang voor specifieke gedragingen, zoals CO 2 vermijden, proboscis uitbreiding en reuze-vezels gemedieerde schrikreacties 2-4. Aangezien de sterke lichtbron gebruikt om ook stimuleren ChR2 fotoreceptoren stimuleren, zijn deze technieken optogenetic niet eerder toegepast in het visuele systeem. Hier combineren we een optogenetic aanpak met een mutatie die fototransductie schaadt de demonstrate dat activering van een cluster van loom-gevoelige neuronen in de vlieg optische kwab, Foma-1 neuronen, rijdt een vluchtgedrag gebruikt om botsing te voorkomen. We gebruikten een nul-allel van een essentieel onderdeel van de fototransductiecascade, aan fosfolipase C-β, gecodeerd door het gen norpA, dat zij de blinde vliegt en ook de Gal4-UAS transcriptionele activator systeem expressie van ChR2 rijden in de Foma-1 neuronen. Individuele vliegen worden geplaatst op een klein platform omringd door blauwe LED's. Wanneer de LEDs branden, de vliegen snel opstijgen in vlucht, op soortgelijke wijze visueel gedreven loom-vluchtgedrag. Wij geloven dat deze techniek kan gemakkelijk worden aangepast aan andere gedrag onderzocht in vrij bewegende vliegen.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved