Isolatie van Human atriale Myocyten voor gelijktijdige metingen van Ca

De studie van de elektrofysiologische eigenschappen van de cardiale ionenkanalen met de patch-clamp techniek en de verkenning van cardiale cellulaire Ca ^{2 +} behandeling van afwijkingen vereist geïsoleerde hartspiercellen. Bovendien is de mogelijkheid om myocyten onderzoeken van patiënten met behulp van deze technieken is een waardevol vereiste om de moleculaire basis van hartaandoeningen zoals atriale fibrillatie (AF) te helderen. ¹ Hier beschrijven we een werkwijze voor het isoleren van menselijke atriale myocyten die geschikt zijn voor beide patch-clamp studies en gelijktijdige meting van intracellulaire ^{Ca2 +} concentraties. Eerst worden rechts hartoren verkregen van patiënten die een openhartoperatie gesneden in kleine stukjes weefsel ("chunk method") en in ^{Ca2 +-vrije} oplossing gewassen. Dan het weefsel brokken verteerd in collagenase en protease bevattende oplossingen met 20 uM ^{Ca2 +.} Daarna, de geïsoleerde myocyten zijn harvested door filtratie en centrifugering van de weefselsuspensie. Tenslotte wordt de ^{Ca2 +-concentratie} in de cel opslagoplossing stapsgewijs aangepast tot 0,2 mM. We kort de betekenis van Ca ^{2 +} te bespreken en Ca ^{2 +} buffering tijdens de isolatie proces en bieden ook representatief opnames van actiepotentialen en membraan stromen, zowel samen met gelijktijdige Ca ^{2 +} voorbijgaande metingen, uitgevoerd in deze geïsoleerde myocyten.