Ca aynı anda Ölçümler İnsan Atriyal miyositlerin izolasyonu

Yama klemp tekniği ve kalp hücresel Ca ² arama ile kardiyak iyon kanallarının elektrofizyolojik özelliklerinin çalışma ⁺ taşıma anomaliler izole kardiyomiyositlerin gerektirir. Buna ek olarak, bu yöntemler kullanılarak hastaların miyositleri araştırmak için olasılık, bu tür atriyal fibrilasyon (AF) ve kalp hastalıklarının moleküler temeli aydınlatmak için çok değerli bir gerekliliktir. ¹ Burada her iki için uygun olan insan atrial miyositlerinde bölgesinin izolasyonu için bir yöntem tarif Patch-clamp çalışmaları ve hücre içi ^{Ca2 +} konsantrasyonu aynı anda ölçümleri. İlk olarak, açık kalp cerrahisi uygulanan hastalarda elde edilen sağ atriyal uzantıları küçük doku parçaları ("yığın yöntemi") içine doğranmış ve ^+-ücretsiz bir çözüm Ca ² yıkanır. Daha sonra doku parçaları 20 mcM Ca ^{2 +} ile çözümler içeren kollajenaz ve proteaz sindirilir. Bundan sonra, izole edilmiş olan miyosit Harvedoku süspansiyonu filtrasyon ve santrifüj ile sted. Son olarak, hücre depolama çözelti içinde ^{Ca2 +} konsantrasyonu 0.2 mM kademeli bir şekilde ayarlanır. Biz kısaca ⁺ ve Ca ^{2 +} izolasyon işlemi sırasında tampon ve aksiyon potansiyelleri ve membran akımlarının temsilcisi kayıtları sağlamak, her ikisi birlikte aynı anda Ca ^{2 +} geçici ölçümler, bu izole miyositler yapılan ile Ca ² anlamını tartışmak.