Levende cellecyklusanalyse af

Flowcytometri har været meget anvendt til at indhente oplysninger om DNA-indhold i en population af celler, at udlede relative procenttal i forskellige cellecyklusfaser. Denne teknik er blevet udvidet til mitotiske væv modelorganismen Drosophila melanogaster for genetiske studier af cellecyklusregulering in vivo. Når kombineret med celletypespecifik fluorescerende protein udtryk og genetiske manipulationer, kan man få detaljerede oplysninger om effekter på celle nummer, cellestørrelse og cellecyklus indfasning vivo. Men denne levende-celle metode har påberåbt sig brugen af ​​cellen gennemtrængelig Hoechst 33342 DNA-interkalerende farvestof, begrænser brugerne til flowcytometre udstyret med en UV-laser. Vi har ændret denne protokol til at bruge en nyere live-cell DNA farvestof, Vybrant DyeCycle Violet, forenelige med de mere almindelige violette 405nm laser. Protokollen præsenteres her tillader effektiv cellecyklusanalyse kombineret med celletype relativ cellestørrelse og celle nummer information, i en række Drosophila væv. Denne protokol udvider nyttige cellecyklusanalyse teknik for levende Drosophila væv til en lille bordplade analysator, den Attune Akustisk Fokusering cytometer, der kan køres og vedligeholdes på en enkelt laboratorieskala.