Жить анализ клеточного цикла

Проточная цитометрия широко используется для получения информации о ДНК в популяции клеток, чтобы вывести относительное процентное в различных фазах клеточного цикла. Этот метод был успешно распространен на митотических тканях модельного организма дрозофилы для генетических исследований регуляции клеточного цикла в естественных условиях. В сочетании с сотового типа конкретных флуоресцентных экспрессии белка и генетических манипуляций, можно получить подробную информацию о влияние на количество клеток, размеров клеток и клеточного цикла постепенно в естественных условиях. Однако эта живых клеток метод опирается на использование клетки проницаемыми Hoechst 33342 ДНК-интеркалирующего красителя, ограничивая пользователей проточных цитометров оснащен УФ-лазера. Мы модифицировали этот протокол использовать новые живых клеток ДНК краситель, Vybrant DyeCycle фиолетовый, совместимый с более распространенными фиолетовый 405 нм лазер. Протокол, представленные здесь позволяет проводить эффективный анализ клеточного цикла в сочетании с ячейкитип, относительный размер ячейки и информация количество клеток, в различных тканях дрозофилы. Этот протокол расширяет полезную клеточного цикла анализа для живых тканей Drosophila в небольшой настольный анализатор, Attune Акустическая Цитометр фокусировки, которая может быть запущена и поддерживается на одном-лабораторном масштабе.