Abstract
Neuroscience
ويرتبط العجز على المدى الطويل بعد TBI المعرفية مع الإصابة التي يسببها تنكس عصبي في المنطقة A-الحصين في الفص الصدغي الإنسي التي تعد حيوية للذاكرة والتعلم والوظيفة التنفيذية، 1،2 وبالتالي لدينا دراسات تركز على تحليل التعبير الجيني من الخلايا العصبية المحددة السكان في المناطق دون الإقليمية المتميزة للقرن آمون. وقد سمحت هذه التقنية للتسليخ مجهري التقاط الليزر (LCM)، وعرض في عام 1996 من قبل Emmert-باك، وآخرون، 3 للتقدما كبيرا في تحليل التعبير الجيني للخلايا وحيدة وإثراء السكان من الخلايا من الأنسجة غير متجانسة مثل الدماغ الذي يحتوي على الثدييات الآلاف من أنواع الخلايا الوظيفية .. 4 نستخدم LCM ونموذج الفئران راسخة من إصابات في الدماغ (المصرف التجاري العراقي) للتحقيق في الآليات الجزيئية التي تكمن وراء التسبب في TBI. بعد قرع السائل TBI، تتم إزالة العقول في أوقات محددة سلفا ما بعد الإصابة، تجميد فورا على الثلج الجاف،وأعدت لتقطيع في ناظم البرد. يمكن تضمين أدمغة الفئران في أكتوبر ومقطوع على الفور، أو تخزينها عدة أشهر في -80 درجة مئوية قبل تقطيع ليزر القبض تسليخ مجهري. بالإضافة إلى ذلك، ونحن نستخدم LCM لدراسة آثار TBI على إيقاعات الساعة البيولوجية. لهذا، فإننا التقاط الخلايا العصبية من نوى فوق التصالبة التي تحتوي على مدار الساعة ماجستير في الدماغ في الثدييات. هنا، ونحن لشرح استخدام واحد للحصول على LCM الخلايا العصبية التي تم تحديدها (وجرح التحول، الفلورية اليشم إيجابية، أو لم يصب، الفلورية اليشم السلبية) والسكان من الخلايا العصبية قرن آمون المخصب لاحقة تحليل الجينات التعبير PCR الوقت الحقيقي، و/ أو كامل الجينوم ميكروأرس. وقد كشفت هذه الدراسات LCM تمكين أن تنعكس الضعف انتقائية من مناطق مختلفة تشريحيا من قرن آمون الفئران في ملامح التعبير الجيني مختلفة من مجموعات مختلفة من الخلايا العصبية التي حصلت عليها من هذه المناطق LCM متميزة. النتائج من الدراسات وحيدة الخلية لدينا، حيثقارنا ملامح الترانسكربتي من الموت والبقاء على قيد الحياة مجاور الخلايا العصبية قرن آمون، واقتراح وجود خلية مقاومة متغيرة التي تنظم بقاء موت الخلايا والبقاء على قيد الحياة بعد TBI.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved