Stereotaktisk injektion av en viral vektor för villkorad Gene Manipulation i ryggmärgen hos möss

Intraparenkymal injektion av en viral vektor möjliggör villkorlig genmanipulation i distinkta populationer av nervceller eller vissa regioner i centrala nervsystemet. Vi visar en stereotaxisk injektion teknik som tillåter riktad genexpression eller tystande i det dorsala hornet av ryggmärgen hos möss. Det kirurgiska ingreppet är kort. Det kräver laminektomi av en enda kota, ger för snabb återhämtning av djuret och felfri motilitet av ryggraden. Kontrollerad injektion av en liten vektor upphängning volym på låg hastighet och användning av en mikrospruta med avfasade glas kanyl minimera vävnaden lesionen. Den lokala immunsvaret till vektorn beror på de inneboende egenskaperna hos den använda viruset, i vår erfarenhet, är det mindre och kortlivat när en rekombinant adeno-associerat virus används. En reportergen som förstärkt grönt fluorescerande protein underlättar övervakning rumsliga fördelningen av vektorn, och effekt och cellulära speficity av transfektionen.