In vivo Måling af Mouse Pulmonal endoteloverfladen Layer

Den endotheliale glycocalyx er et lag af proteoglycaner og tilhørende glycosaminoglycaner foring det vaskulære lumen. In vivo er glycocalyx kraftigt hydratiserede, danner en væsentlig endotel overfladelag (ESL), der bidrager til opretholdelsen af endotelfunktion. Da den endotele glycocalyx er ofte afvigende in vitro og forsvinder under standard vævsfiksering teknikker, undersøgelse af ESL kræver anvendelse af intravital mikroskopi. For bedst at tilnærme den komplekse fysiologi alveolar mikrovaskulatur, er pulmonal intravital billeddannelse ideelt udført på en frit bevægelig lunge. Disse præparater er imidlertid typisk lider omfattende bevægelsesartefakter. Vi viser, hvordan lukkede brystet intravital mikroskopi af en frit bevægelig muselunge kan anvendes til at måle glycocalyx integritet via ESL udelukkelse af fluorescens-mærkede højmolekylære dextraner fra den endoteloverfladen. Denne manglende inddrivelse kirurgisk teknik, som kræversamtidig lysfelt og fluorescerende billeddannelse af muselunge, tillader langsgående observation af subpleural mikrovaskulatur uden tegn på at inducere confounding lungeskade.