Imagerie en temps réel des hétérotypique plaquettes neutrophiles interactions sur l'endothélium activé lors de l'inflammation vasculaire et la formation de thrombus chez des souris vivantes

L'interaction des plaquettes activées et des leucocytes neutrophiles (essentiellement) sur l'endothélium activé médie la thrombose et l'inflammation vasculaire. ^1,2 Au cours de la formation de thrombus au site de la lésion artériolaire, plaquettes adhérentes à l'endothélium activé et protéines de la matrice de support de roulement sous-endothéliales des neutrophiles et d'adhérence. ³ Inversement, dans des conditions inflammatoires veinules, les neutrophiles adhérents à l'endothélium activé peut prendre en charge l'adhésion et l'accumulation des plaquettes circulantes. Hétérotypique plaquettes agrégation des neutrophiles nécessite des processus séquentiels par les interactions spécifiques des récepteurs à gré entre les cellules. ⁴ Il est connu que les cellules endothéliales activées libèrent des molécules d'adhésion telles que le facteur von Willebrand, amorçant ainsi l'adhésion des plaquettes et accumulation dans les conditions de cisaillement élevées. ^{5 En} outre, cellules endothéliales activées en charge de roulement et l'adhérence des neutrophiles par les sélectines exprimant uneMolécule d-1 d'adhésion intercellulaire (ICAM-1), respectivement, dans des conditions de faible cisaillement. ⁴ plaquettes P-sélectine interagit avec les neutrophiles par la P-sélectine ligand glycoprotéine-1 (PSGL-1), ce qui induit l'activation des neutrophiles de β2 intégrines et fermes l'adhérence entre deux types de cellules. Malgré les progrès réalisés dans des expériences in vitro dans lequel hétérotypiques plaquettes neutrophiles interactions sont déterminées dans le sang ou des cellules isolées, ^6,7 ces études ne peuvent pas manipuler les conditions de stress oxydant au cours de la maladie vasculaire. Dans ce rapport, l'aide à marquage fluorescent, des anticorps spécifiques contre une souris plaquettes et des neutrophiles marqueur, nous décrivons un protocole détaillé intravitale microscopique pour surveiller les interactions hétérotypiques de plaquettes et de neutrophiles sur l'endothélium activé lors de TNF-α induite par l'inflammation ou à la suite induite par laser blessure musculaire crémaster microvaisseaux des souris vivantes.