Måling Intracellular Ca

Spermatozoer er mandlige kønsceller specielt designet til at nå ud til, anerkende og fusionere med ægget. For at udføre disse opgaver, skal sædceller være parat til at stå over for en konstant skiftende miljø og for at overvinde flere fysiske barrierer. At være i det væsentlige transskriptionelt og translationelt tavse, disse motile celler afhængige dybt på diverse signaleringsmekanismer at orientere sig og svømme i en rettet måde og for at kæmpe med udfordrende miljøforholdene i løbet af deres rejse for at finde ægget. Navnlig er ^{Ca2 +-medieret} signalering afgørende for flere sædceller funktioner: aktivering af motilitet, capacitation (en kompleks proces, der forbereder sæd for akrosome reaktion) og akrosome reaktion (en exocytotiske begivenhed, der giver sæd-æg fusion). Anvendelsen af ​​fluorescerende farvestoffer til at spore intracellulære udsving i denne ion er af bemærkelsesværdig betydning på grund af deres lette anvendelse, følsomhed og alsidighed thefdeling. Ved at bruge en enkelt farvestof-loading-protokol vi udnytter fire forskellige fluorometriske teknikker til overvågning sæd Ca ^{2 +} dynamik. Hver teknik giver forskellige oplysninger, der muliggør rumlig og / eller tidsmæssig opløsning, genererer data både på enkelt celle og celle befolkningstallet.