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Abstract

Neuroscience

Vivo सी. में neuronal कैल्शियम इमेजिंग में एलिगेंस

Published: April 10th, 2013

DOI:

10.3791/50357

1Department of Physiology and Biophysics, Boston University School of Medicine, 2Boston University Photonics Center
* These authors contributed equally

निमेटोड कीड़ा सी. एलिगेंस अपेक्षाकृत सरल है, vivo में कम लागत neuronal इमेजिंग के लिए एक आदर्श मॉडल जीव है. अपने छोटे पारदर्शी शरीर और सरल, अच्छी तरह से विशेषता तंत्रिका तंत्र और बरकरार पशु के भीतर किसी भी न्यूरॉन के प्रतिदीप्ति इमेजिंग की पहचान की अनुमति देता है. पशु शरीर क्रिया विज्ञान पर न्यूनतम प्रभाव के साथ सरल स्थिरीकरण तकनीक विस्तारित समय चूक इमेजिंग की अनुमति देते हैं. cameleon 1 और 2 GCaMP के रूप में आनुवंशिक रूप से इनकोडिंग कैल्शियम संवेदनशील fluorophores के विकास neuronal दोनों सेल फिजियोलॉजी और neuronal गतिविधि से संबंधित कैल्शियम के vivo इमेजिंग में अनुमति देते हैं. कई ट्रांसजेनिक विशिष्ट न्यूरॉन्स में इन fluorophores व्यक्त उपभेदों आसानी से उपलब्ध हैं या अच्छी तरह से स्थापित तकनीक का उपयोग करते हुए निर्माण किया जा सकता है. यहाँ, हम vivo में एक न्यूरॉन का उपयोग दोनों GCaMP और cameleon के भीतर कैल्शियम गतिशीलता को मापने के लिए विस्तृत प्रक्रिया का वर्णन करता है. हम फायदे और disadvant पर चर्चादोनों की उम्र के रूप में के रूप में अच्छी तरह से नमूना (जानवर स्थिरीकरण) तैयार करने और छवि विश्लेषण के विभिन्न तरीकों. अंत में, हम दो प्रयोगों से परिणाम वर्तमान: 1) GCaMP का उपयोग करने के लिए एक बाहरी बिजली के क्षेत्र और 2 के लिए एक विशिष्ट न्यूरॉन के संवेदी प्रतिक्रिया) cameleon का उपयोग करने के लिए दर्दनाक लेजर क्षति के लिए एक न्यूरॉन के शारीरिक कैल्शियम प्रतिक्रिया को मापने को मापने. इस तरह के रूप में इन कैल्शियम इमेजिंग तकनीक सी. में बड़े पैमाने पर उपयोग किया जाता है एलिगेंस और आज़ादी से चलती जानवरों, एक साथ एकाधिक न्यूरॉन्स और तुलना में किया गया है आनुवंशिक पृष्ठभूमि भर माप सी. बढ़ाया. एलिगेंस लिए अन्य मॉडल सिस्टम पर तकनीकी सादगी और लागत में लाभ के साथ vivo neuronal इमेजिंग में एक मजबूत और लचीली प्रणाली प्रस्तुत करता है.

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