Abstract
Biology
현장 하이브리드 화에 형광 (FISH) 방법은 하나의 기본 세포 환경에서 핵산을 검출 할 수 있습니다. 여기에서 우리는 하나의 효모 세포에서의 mRNA의 수를 정량화하기 위해 FISH를 사용하기위한 프로토콜을 제공합니다. 세포는 그 어떤 조건에서 재배하고 고정 투과 할 수있다. 그 후, 형광 염료에 결합 여러 개의 단일 가닥 deoxyoligonucleotides이의 mRNA 레이블을 시각화하는 데 사용됩니다. 하나의 mRNA 분자의 회절 형광 셀 당의 mRNA의 수를 확인하고 계산하는 자리 탐지 알고리즘을 사용하여 계량입니다. 북부 오, RT-PCR 유전자 발현 마이크로 어레이의 더 많은 표준 정량화 방법은 대량 인구의 평균의 mRNA에 대한 정보를 제공하는 반면, FISH는 단일 분자 해상도에서 단일 세포에서 계산하고이 mRNA가 국산화 모두를 용이하게합니다.
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