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Biology

成像和胚胎斑马鱼脑血管结构的三维重建

Published: April 22nd, 2014

DOI:

10.3791/50417

1Molecular Neurobiology, Western University of Health Sciences, 2Graduate College of Biomedical Sciences, Western University of Health Sciences, 3College of Osteopathic Medicine of the Pacific, Western University of Health Sciences, 4College of Optometry, Western University of Health Sciences

斑马鱼是一种强大的工具来研究发育生物学和病理学的体内 。小尺寸和斑马鱼胚胎的相对透明度使其成为如心脏和血管发育过程中的目视检查特别有用。在最近的一些研究,表达EGFP的血管内皮细胞中的转基因斑马鱼被用于图像和分析复杂的血管网络在大脑和视网膜,使用共聚焦显微镜。提供说明的准备,处理和图像表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)斑马鱼胚胎,然后生成脑血管系统的全面的3D效果图。协议包括治疗胚胎,共焦成像,和固定通讯协定,保护绿色荧光蛋白的荧光。此外,设置在获取脑结构,如摘除眼球不破坏附近的神经组织的高品质图像的有用提示。潜在的陷阱用共聚焦成像进行了讨论,同时要生成共聚焦图像堆栈使用免费的开源软件,三维重建的步骤。

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